苦皮藤假种皮中的杀菌活性成分研究 KSYHPD

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农药学学报苦皮藤假种皮中的杀菌活性成分研究杨征敏吴文君1王明安2周文明3西北农林科技大学植物保护学院，陕西杨陵712100；2中国农业大学应用化学学院，北京100094西北农沐科技学生命科学卞院和间1它们抑制3斑病阳心也，爪汗萌发的。心169.291其中麝香草酚为首次在卫矛科植物中分离得到，多羟基氢沉香呋喃为首次在苦皮藤中分离得到。

生木质藤本植物，吴文君等对苦皮藤根皮和叶子中的昆虫拒食麻醉及毒上海seo杀活性成分进行了研究1关于苦皮藤的杀菌活性，早在50年代曾有文献报道其根皮粉30倍水浸液对马铃薯晚奴病尸如欣7抑018.山83了抱1发抑制作4，近年来，天文昨1以苦皮藤假种皮提取物为主成分研制成杀菌剂霜疫必克，并对其杀菌活性田间防效及作用方式等进行了初步研宄5！但上述这些研究报道均尚未涉及苦皮藤的杀菌活性成分。为此作者对苦皮藤假种皮进打系统提在活性追踪指导下。从分离鉴定出3个具有杀菌活性的化合物通过高分辨质谱和13河只对其结构进行了确证，并测定了它们抑制玉米小斑病菌价，7.71.孢萌发的毒力，现报道如下1材料与方法1.1供试材料1.1.1苦皮藤假种皮1998年8月在陕西省周至县甘浴湾乡和陈河乡采苦皮藤果实经西①通讯联系人，然科学农药学学报北梢物研允所杨金祥研究。鉴定，剥离假种皮，风十，粉碎。

1.1.2供试病原菌玉米小斑病菌5中，也7吵此，由西北农林科技大学植保学院植物病理教研组提供。

1.1.3供试盆栽植物玉米陕9为感病品矛中。

1.2供试仪器756河0紫外可分光光度计上海第分析仪器厂；分析制备型高效液相色谱仪美国贾入，公司；薄层自动铺板器重庆南岸新力实验电器厂；薄板自动点样器瑞士，牒盈0公1.；4型数字，1微馆点测记仪北裒泰克仪器有限公司81诚1.1高分辨质谱仪和1.1似500 130侧核磁几振谱仪。3实验方法1.3.1活性追踪方法采用菌丝生长速率法孢子萌发实验法和温室盆栽试验进行活性追踪，几体方法参照文献6.7 1.3.2苦反藤庚种反=杀菌成分的提取在室温条件下，将苦皮藤假种皮粉4.2分别叫2509乙醇，工业苯和石油醚依次提取34乙醇水的提取液在大搪瓷盘中吹干即可得到抽提物2308；苯石油醚提取液减压浓缩生物活性追踪测定结果说明，2乙醇提取物有较高的杀菌活性，其它提取物几乎没有杀菌活性I.3.3苦反藤庚种反。杀成分的孑离用3，硅胶与2究乙醇抽提物23拌幻，吹，装耐酸过滤漏分别30001的1厂醇甲醇蒸馏水洗脱，收集并浓缩各洗脱液。将有杀菌活性的正丁醇洗脱物548用70，氯仿溶解，以5脱含水甲醇萃取3次，浓缩得到有名心的漓仿和8以宁液相以析法以将以4.纯化水反渗透设备58氯仿部分8.18评甲醇部分5.48生测结果明，氯仿部分有很高的杀菌活性将氯仿部分用硅胶层析柱20300目，4008进行柱层析，以氯仿石油醚992为流动相淋洗，控制流速为。V3.5mLmm，i；体积40mL份收集洗脱液，共收，70份淋洗液。根据生测结果和洗脱液组成，合并淋洗液，浓缩得到活性干物质1.358其中第68份洗脱液在溶剂低温缓慢挥发的情况下于烧杯壁上产生淡黄色结晶，以甲醇病酮51重结晶得到个有杀菌活性的无色结晶用薄板自动点样器将活性干物质的丙酮溶液在硅胶板2020，厚度为0.8，共25块上作条状点样，然后将其在石油醚乙酸乙酯72中连续展开两次，*后娃胶板在灯下呈现出5条色带。1.2，3，5，按比移值由小到大的顺序编号，下刮下各色带，分别用丙酮或丙1醇混介物提取色带的物质，过滤并浓缩提取液，其中活性成分Cl230mgC2345mg的溶液很快23h就由浅黄色变为黑色经高效液相色谱分析，其主要成分变化不大，生测结果明和。2在变色前后的杀菌活性变化不大酿性试验证明18，和。2主要是酚类物质。将02用甲醇提取，得到甲醇溶解物。22280以丙酮拓油醚25，35为展开剂，将，1和，22分别在制备型娃胶薄板上连续展开3次，得到两个有杀菌活性的无色结晶，2结果与分析2.1化学结构分析C3H，5.3H，dd，=24，4.8№，COH，1.401H，s，4，1.6氏8，5由以上结果可以推断其结构为1丁，2丁，496487913七羟基氢沉香呋喃，为首次在苦皮藤中分离鉴定物为麝香草酚，为首次从卫矛科植物中分离得奎2.2活性成分的毒力测定了3个化合物在离体条件下抑制玉米小斑病菌5中0，而孢子萌发的毒力，结果1结果说明，化介物1对玉米小斑病菌的毒力*强，为2227，化介物1毒力*源这呜结果从个侧面说明，苫皮藤假种皮中杀菌成分可能1要是酚类化介物3吴文君，王明安，刘惠霞等。农药学学报，2003146 4中国土农药科学研宄编辑委员会。中国土农药志，北京科学出版社，19599293 5钮绪艳，吴文君，丁伟。西北农业学报，199318386 6陈年春。农药生物测定技术，北京北京农业大学出版社，1991 7慕立义，吴文君，王开运。植物化学保护研宄方法，北京中国农业出版社，19947858陈耀祖省机分析，北京高等教育出版社，1983346347

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